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第十一章 核酸标记及检测
第十二章 蛋白质研究
附录一 常用实验方法
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AbD Serotec LYNX快速抗体标记试剂盒

LYNX快速抗体标记试剂盒     

                             

快速标记抗体,省出更多时间去做研究!

     简单:一步法标记抗体

     快速:操作仅需30

     高效:被标记抗体的回收率达100%

     实惠:可标记mgmg级抗体

 Ø  易于制备

制备标记的抗体变得如此简单!因为我们的试剂盒:

ü      只需耗费30秒操作时间!

ü      整个标记过程可在3小时内或过夜完成!

ü      创新的技术令您有更多时间和弹性更快地向您的研究目标迈进!

ü      无需学习复杂的新技术或购买另外的设备!

Ø      立即可用

         以LYNX Kits标记的抗体可以被立即使用!一个简单的淬灭步骤即可终止标记反应、无需进一步处理。没有高分子量聚集物、无需脱盐柱或额外的透析步骤。与传统的标记技术(如标记物的硫醇化或马来酰活化)相比,此技术可节省大量时间。LYNX Kit亦在接近生理pH值下进行反应、温和地处理抗体。

Ø   结果一致

         由于LYNX技术无需标记后的清洁步骤,避免了造成抗体损失或者批间差异的主要原因,因此每一次都能100%生产出高质量的标记抗体。按比例增加产量也变得容易了:一旦您用小量抗体优化了反应条件,无论每批规模如何,标记用时均一样。这意味着您可以同样容易地标记毫克级的抗体。

Ø      多种选择

          LYNX Kits有多种标记物和规格,总有一款适合您。标记物包括:Alkaline PhosphataseAPCAPC-Cy5.5APC-Cy7BiotinCy5FluoresceinGlucose OxidaseHorseradish PeroxidasePerCPPerCP-Cy5.5RPERPE-Cy5RPE-Cy5.5RPE-Cy7。如需了解完整的包装规格,请查阅后面的列表。

操作步骤:

1)        在每10µl 抗体样品中加入 1 µl LYNX Modifier Reagent,轻柔混匀。

2)        吸取步骤1的混合液加至LYNX冻干混合物中,轻柔的吹吸两次使得粉末完全溶解。

3)        盖上瓶盖,室温(20-25°C)避光孵育至少3小时或过夜*

4)        孵育后,按每10µl抗体加入1 µl LYNX Quencher Reagent,静置反应30分钟。

*标记物不同,操作步骤略有不同)

 

Ø                LYNX工作原理

LYNX试剂盒将生物素、酶或荧光染料共价连接至胺基基团,从而产生高质量标记抗体。该类试剂盒可以用于标记纯化的抗体及其他蛋白质,只要后者含有必需的、用于连接的胺基基团。抗体应该含有多个用于标记的胺基基团,存在于赖氨酸残基上或以a胺基基团形式呈现。由于标记物和抗体之间形成的是共价键,所以所制备的标记抗体会很稳定并可保存至将来实验使用。

Ø                标记抗体的使用——用途和缓冲液

一旦完成标记,LYNX步骤即灭活所有的标记试剂,抗体因而可以立即用于实验。连接标记步骤一次完成,当你准备实验时请预先准备好你的抗体样本。由于大多数用途都包括一步洗涤步骤以去除任何残余标记物,因此标记抗体可直接用于ELISA、流式细胞术、免疫组化以及Western blotting。如果您的用途不包括洗涤步骤,在必要的情况下,可以通过凝胶过滤法从标记抗体分离去除游离的标记物。

 

注意事项:

缓冲液

n         缓冲液中不能含胺基

n         HEPESMESMOPS彼此兼容

n         磷酸盐缓冲液可能会抑制碱性磷酸酶免疫检测

n         高达20mMTris 缓冲液可能会轻微降低反应效率

 

添加剂

n         糖和盐不会干扰偶联反应

n         EDTA这样的螯合剂也可以用

n         避免还原剂(如DTT2-巯基乙醇)、阻断剂(如乙醇胺)和亲核剂(如甘氨酸)

 

使用叠氮钠

n         叠氮钠(0.02-0.1%)可能会轻微降低标记效率

n         叠氮钠不可用于HRP标记抗体,因为前者是后者的不可逆抑制剂

 

pH

n         在生理pH附近工作

 

贮存

n         4°C,与标记物和抗体均兼容的缓冲液中贮存

n         如采用其他贮存条件,请先以小量样品测试,然后再进行大量贮存

 

 

标记物和产品形式列表:

荧光染料:

标记物

每次标记反应中被标记的抗体量

标记反应次数

目录号

Allophycocyanin(APC)

100 - 150 μg

100 - 150 μg

1.0 -1.50 mg

1

3

1

LNK031APC

LNK032APC

LNK033APC

Cy5

100 - 200 μg

1.0 -2.0 mg

3

1

LNK101CY5

LNK102CY5

Fluorescein

100 - 200 µg

1.0 - 2.0 mg

3

1

LNK061F

LNK062F

PerCP

100 µg

100 µg

1.0 mg

1

3

1

LNK071PERCP

LNK072PERCP

LNK073PERCP

R-Phycoerythrin(RPE)

50 - 60 μg

50 - 60 μg

0.5 – 0.6 mg

1

3

1

LNK021RPE

LNK022RPE

LNK023RPE

串联染料:

标记物

每次标记反应中被标记的抗体量

标记反应次数

目录号

APC-Cy5.5

100 - 150 μg

100 - 150 μg

1.0 -1.50 mg

1

3

1

LNK121APCCY5.5

LNK122APCCY5.5

LNK123APCCY5.5

APC-Cy7

100 - 150 μg

100 - 150 μg

1.0 -1.50 mg

1

3

1

LNK131APCCY7

LNK132APCCY7

LNK133APCCY7

PerCP-Cy5.5

100 μg

100μg

1.0 mg

1

3

1

LNK141PERCPCY5.5

LNK142PERCPCY5.5

LNK143PERCPCY5.5

R-Phycoerythrin-Cy5

(RPE-Cy5)

50 - 60 μg

50 - 60 μg

0.5 -0.6 mg

1

3

1

LNK081C

LNK082C

LNK083C

R-Phycoerythrin-Cy5.5 (RPE-Cy5.5)

50 - 60 μg

50 - 60 μg

0.5 -0.6 mg

1

3

1

LNK091PECY5.5

LNK092PECY5.5

LNK093PECY5.5

R-Phycoerythrin-Cy7 (RPE-Cy7)

50 - 60 μg

50 - 60 μg

0.5 -0.6 mg

1

3

1

LNK111PECY7

LNK112PECY7

LNK113PECY7

酶及其它:

标记物

每次标记反应中被标记的抗体量

标记反应次数

目录号

Alkaline Phosphatase (Alk. Phos.)

100 μg

100μg

1.0 mg

1

3

1

LNK011AP

LNK012AP

LNK013AP

Biotin

100-200 μg

1.0 -2.0mg

3

1

LNK041B

LNK042B

Glucose Oxidase (GOx)

80-100 µg

0.8-1.0 mg

3

1

LNK051GOX

LNK052GOX

Horseradish Peroxidase (HRP)

100-400 µg

100-400 µg

1.0-4.0 mg

1.0-4.0 mg

5.0 - 20 mg

1

3

1

5

1

LNK001P

LNK002P

LNK003P

LNK004P

LNK005P

版权所有 2009 杭州宝科生物科技有限公司

电话:0571-87046760 85976350 传真:0571-87040537  电子信箱:info@bioke.cn 备案:
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